Continuamos con la Extracción de ADN en Sangre Periférica

OBJETIVO

Aprender a aislar el ADN de una muestra que en este caso es de sangre, al ser la más común, evitando la contaminación.

MATERIAL

• Nuestro tubo cónico con la preparación
• NaCl saturado 
• Etanol absoluto 
• Etanol 70% 
• 2 microtubos
• Varilla 
• Agua estéril destilada
• Gradilla

PROCEDIMIENTO

1. Añadimos 160  μL de NaCl y lo llevamos al vortex
2. Añadimos dos volúmenes de etanol absoluto frío y mezclamos por inmersión observando la formación de un ovillo de ADN precipitado
3. 
   
4. Capturamos la madeja de ADN  con una varilla 
5. Lavamos la madeja con un microtubo con etanol al 70% 
6. Dejamos secar el ADN  en la varilla durante 30 minuto, apoyando la varilla sobre una gradilla y la pasamos a un microtubo vacío 
7. La resuspendemos en 300  μL de agua estéril destilada 

OBSERVACIONES

En nuestra primera preparación no obtuvimos el ADN de la sangre, esta era muy oscura pero realmente no sabemos cual fue el problema en concreto, en vista de que el color de nuestra sangre y los resultados que obteníamos tras los pasos, decidimos que a parte de acabar hoy la práctica con esa muestra iniciaríamos otra vez la práctica con otra muestra distinta de sangre.

Así que la segunda muestra se quedó en incubación a temperatura ambiente durante la noche y al día siguiente pudimos capturar su ADN.