Preparación del Gel de Agarosa y Tampón de Electroforesis

OBJETIVO

Preparar los reactivos (gel de agarosa y tampón de electroforesis) para poder llevar a cabo una electroforesis.

MATERIALES

• Bandeja con peine
• Agarosa
• TBE 10x
• TBE 1x
• Agarosa 100g
• Microondas
• Pipeta y prepipeta
• Matraz Erlenmeyer
• Probeta
• Agua destilada
• Colorante Midori Green
• Agua para biología molecular

PROCEDIMIENTO: TAMPÓN ELECTROFORESIS

1. Añadimos a una probeta de 300 mL un poco de agua destilada y después los 30 mL de TBE10x 
2. Añadimos agua destilada hasta 300 mL 
3. Mezclamos

PROCEDIMIENTO: AGAROSA

1. Preparamos la bandeja con el peine 
2. Pesamos la agarosa (1g) directamente en el matraz erlenmeyer y añadimos los 50 mL de TBE
3. Lo introducimos en el microondas y vamos comprobando y agitando el vaso de vez en cuando hasta que se vuelva transparente 
4. Añadimos 5 µl de Midori Green a la agarosa líquida, movemos para distribuir uniformemente 
5. Lo vertimos cuidadosamente en la bandeja con el peine colocado para evitar la formación de burbujas
6. Dejamos que polimerice a temperatura ambiente hasta que la agarosa deje de estar transparente
7. Quitamos el peine levantándolo cuidadosamente y evitando moverlo hacia los lados para no mover los pocillos

OBSERVACIONES

También se realizó un gel de electroforesis grande con un mayor número de peines para que en la próxima practica toda la clase practicara sobre el mismo gel.