Criopreservación Células de Insecto

Antes de proceder a congelar nuestras células tenemos que realizar una tinción de azul tripán, como anteriormente, para calcular la viabilidad de nuestras células y el numero de crioviales  que necesitaremos para congelarlas, pero en la práctica de hoy nos centraremos en la criopreservación como tal.

El objetivo de esta práctica es aprender a mantener nuestras células a través de la criopreservación.

MATERIALES:

• Nuestro T25
• Pipetas
• Prepipetas
• DMSO o glicerol
• Centrífuga
• PBS
• Tubo falcon 
• Crioviales

CONGELACIÓN:

1.Sacamos nuestro T25 de la incubadora, siempre cerrándolo antes de sacarlo.

2.De manera aséptica, en nuestra cabina, lo pasamos a un tubo Falcon.

3.Centrifugamos durante 8 min.

4.Volvemos a la cabina con el falcon centrifugado y quitamos el sobrenadante.

5.Debido a la viabilidad de las células añadimos el DMSO+PBS necesario.

6.Resuspendemos en el tubo falcon.

7.Dividimos la mezcla en los crioviales. 

8.Finalmente metemos en el congelador a -80ºC