Criopreservación Hibridomas

En la práctica anterior calculemos cual era la viabilidad de nuestro cultivo y el número de crioviales que nos hacían falta para congelar nuestro cultivo de hibridomas.

El objetivo de la práctica no es otro que la criopresevación de hibridomas.

MATERIALES:

• Nuestro T25
• Pipetas
• Prepipetas
• DMSO o glicerol
• Centrífuga
• Tubo falcon 
• Crioviales

CONGELACIÓN:

1.Sacamos nuestro T25 de la incubadora, siempre cerrándolo antes de sacarlo.

2.De manera aséptica, en nuestra cabina, lo pasamos a un tubo Falcon.

3.Centrifugamos durante 8 min.

4.Volvemos a la cabina con el falcon centrifugado y quitamos el sobrenadante.

5.Debido a la viabilidad de las células añadimos el DMSO necesario.

6.Resuspendemos en el tubo falcon.

7.Dividimos la mezcla en los crioviales. 

8.Finalmente metemos en el congelador a -80ºC