Inicio en el Cariotipo en Sangre Periférica

El objetivo de esta practica es preparar la muestra de sangre para posteriormente poder elaborar un cariotipo.

MATERIALES:

• Gradilla
• Toallitas desinfectantes
• Lancetas
• Capilares
• Baño termoestático
• Medio de cultivo
• Pipeta de 0.25ml y sus puntas
• Fitohemaglutinina 
• Incubador de CO2
• 0.4ml de sangre

PROCEDIMIENTO:

1. El medio de cultivo (7ml), que hemos identificado, se encuentra congelado por lo que lo introducimos en el baño termoestático a 30º, también introduciremos un tubo de fitohemaglutinina que usaremos toda lal clase de el cual cada grupo extraemos 0.25ml, los necesarios para para preparar nuestra muestra.
2. Después de la descongelación homogeneizamos tanto el medio de cultivo como la fitohemaglutinina.
3. Extraemos la sangre, realizamos dos punciones con la lanceta en los dos dedos corazón. La sangre que va saliendo la introducimos en 4 capilares que en total sumarán 0.4ml de sangre.
4. Añadimos los 0.25 de fitohemaglutinina a el medio de cultivo, antes de añadir la sangre.
5. A continuación agitamos la sangre y le añadimos 0.4ml de sangre a el medio de cultivo.
6. Volvemos a agitar nuestro tubo y lo introducimos en el incubador de CO2 a 37º por 72h y ligeramente abierto.

OBSERVACIONES:

En nuestro cultivo hubo un error en el procedimiento, no se añadió primero la fitohemaglutinina, una lectina que induce la mitosis y la proliferación celular, si no que se introducieron 0.2ml de sangre, la fitohemaglutinina y los 0.2ml de sangre restantes.

Por otro lado también hay que mencionar que la incubación requiere de un periodo de 72 horas, pero por motivos de horarios de clase nuestras células serán incubadas durante 92 horas.