martes, 7 de febrero de 2017

Continuamos con la Extracción de ADN Genómico

OBJETIVO 

Continuamos con la práctica del lunes, para ello necesitaremos los materiales del día anterior.

PROCEDIMIENTO

  1. Añadimos 500 μL de Tampón de deshinibición en el nuevo tubo de recolección, centrifugamos 12000-14000 rpm durante 60 segundos y eleminanos el líquido
  2. Añadimos 500 μL de Tampón de Lavado en el reservorio de la Spin columna y centrifugamos a 12000 rpm durante 60 segundos y eleminamos el líquido
  3. Hacemos un segundo lavado, de nuevo otros 500 μL de Tampón de Lavado, centrifugamos a 14000 rpm durante 60 segundos y volvemos a retirar el liquido
  4. Centrifugamos a máxima velocidad durante 2 minutos y eliminamos el alcohol residual
  5. Eliminamos  el tubo de recogida y ponemos un eppendorff, añadimos 200 μL de Tampón de Elución precalentado a 70ºC e incubamos 1 minuto a temperatura ambiente
  6. Por último centriffugamos a máxima velocidad durante 60 segundos y ya tenemos el ADN genómico en nuestro tubo eppendorff

OBSERVACIONES

El riesgo que tiene hacer esta práctica en dos partes es por ejemplo que el dejar el etanol, sin hacer los lavados pertinentes, durante tanto tiempo con nuestro ADN puede dañarlo, por eso lo ideal es llevar a cabo esta práctica de una vez, cosa que no hemos podido llevar a cabo por los horarios de clase.

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