viernes, 24 de febrero de 2017

Continuamos con la Mutación Puntual en Trombosis



OBJETIVO

Continuamos la práctica anterior.

MATERIALES

  • 5 μL de producto de PCR
  • 5μL Tampón de carga
  • Agua de biología molecular
  • Marcador de peso molecular
  • Tampón de electroforesis
  • Cubeta electroforesis
  •  Gel electroforesis

PROCEDIMIENTO

  1. Preparamos la muestra con 5 μL de nuestro producto de PCR, 5μL de tampón de carga y 10 μL de agua de biología molecular, y resuspendemos
  2. Por cada peine, en nuestro caso dos, 4 μL de marcador de peso molecular, 5 μL de tampón de carga y 11 μL de agua de biología molecular
  3. Llenamos la cubeta con tampón de electroforesis e introducimos el gel 
  4. Procedemos a insertar nuestras muestras de ADN en los pocillos, anotando el orden de colocación del gel 
  5. Conectamos la cubeta a la fuente a un voltaje constante 35 min 
  6. Visualizamos en el transiluminador 

OBSERVACIONES

Hay que prestar mucha atención ha no mover la cubeta de la electroforesis por que el gel que queda adherido puede despegarse y dificultar la carga de las muestras en los pocillos del gel.

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